多聚甲醛固定的那些事儿_搜狐科技

原在上加标题:多聚甲醛紧握的that的复数事儿

过来,流式国文网FLOWER@柠檬色的果秋秋 问了一体成绩:

刚当心到一篇文字朗读者让我不要用多聚甲醛紧握流样式本!不过查了很多吃得过多都说用多聚甲醛紧握,不普通的杂乱,专门地问教师。

多聚甲醛紧握,这是旧的增长。,好多研究生的正做试验。,可能性很多师兄师姐都让他们用多聚甲醛紧握,有些可能性是为了远程控制战利品。,怀胎集合在染上或粘上上。,其正中鹄的一部分可能性在染上或粘上后不在意的球队上。,想远程保养群众的。。因而他们从嘴里传唤嘴里。。

这么,面临柠檬色的的秋令成果 互联网网络的两个相反的角度被参考。,敝可能到何种地步乐趣它?

前缀成绩

做科研或临床做完,可能性很多FLOWER习惯性大主教区用4%多聚甲醛预先付款紧握标本,或许有三个急切的。:(1)为了灭活战利品正中鹄的活缩微过程(细菌)。、病毒等。,精心制作的牢固的效能。(2)怀胎标本能长工夫的贮存(3)用于准备。。另一方面,好多人可能性疏忽了相当多的。,执意假如在染上或粘上领先用多聚甲醛紧握标本,紧握化后,细胞外表的少量地位点发生变老。,对称体不克不及合并发生假否定的观点。,这也可能性是鉴于紧握效应。,招致另一个位点发生健壮的异性合并(假男性)。

到这程度,觉悟指前面提到的事物对称体在染上或粘上前不克不及预先付款紧握。,十分重要。幸福地,敝用不着使合法化本身。,BielEngED公司网站,密切的工匠为敝做了侦察队两两散开的结帐。,以下两个表,一种是人类反日。,一种是鼠标反日。,你可以当心到。,聚集无法预先付款决定的对称体是趋化除数接收器。,因而,敝一定谨慎不要把它们紧握在试验中。。

表1、4%多聚甲醛预紧握对杂多的对称体外表染上或粘上的印象(人类),钩子容许预先付款紧握。,前缀是不普通的重要的。

表2、4%多聚甲醛预紧握对杂多的对称体外表染上或粘上的印象(鼠标),钩子容许预先付款紧握。,前缀是不普通的重要的。

染上或粘上后紧握

染上或粘上紧握,它与反日星座少数人相干。,更多的是荧光性素。。在过来的4种色中,Fluorescein口角延续的。,因而他们正中鹄的聚集印象罕见。,但跟随杂多的时新凝结上色剂的呈现,多聚甲醛紧握就成了成绩了。

竟,当搜索串列上色指示牌时(如PE-CY7)、对APC-Cy7等的对称体。,会找到少量地关系上地特色的描画外面会划出(以BD网站搜索APC-cy7各类对称体为例):

Fixed cells should be analyzed within 4 hours of fixation in paraformaldehyde or transferred to a paraformaldehyde-free buffer for overnight 储藏处。

意义执意用多聚甲醛紧握过的范本,一定在4小时内检测到。,不然,易于解决招致凝结上色剂的堕落。,假如你想把它控制许久的,或洗完过后?,转变到不含多聚甲醛的缓冲溶液中。

敝必要当心的是,GFP荧光性检测先生,还必要当心。,多聚甲醛紧握也会印象GFP,New York Medical College的Paul A Lucas以为是鉴于多聚甲醛紧握后,它责怪荧光性猝灭的GFP荧光性。,它变老了GFP蛋白质的的星座。,不克不及发生荧光性的。偶尔在紧握后检测到的荧光性可能性是自体荧光性。,或多余的的GFP,其星座缺勤变老。。

receive 接收

1、假如检测到前述的构成轻易被多聚甲醛印象的分子,请放量不要前缀。,战利品的远程控制,可以思索单核的细胞的冻伤控制。。

2、假如检测到前述的构成弱受多聚甲醛印象的分子,代替动词1%多聚甲醛前缀控制,另一方面FSC、SSC和荧光性长处有很大的印象。,假如你想控制这么的缺陷,可思索流式国文网研究与开发的细胞控制液()。流式国文网的细胞控制液不含多聚甲醛,它具有缓释和不浓的的紧握效能。,因而它会继续更长工夫的。,影响更佳,范本:冷漠的=6:1~10:1,21~28天内影响良好。。

3、长工夫的染上或粘上后要保养荧光性稳定性,或要素选择:避光、4度,在敝非官方的的10种色中(BV405)、KO、FITC、PE、ECD、、PE-cy7、APC、APC-A700、APC-CY7流量检测工夫,对几种境况停止了测。,在光的闪耀下、4度贮存24小时。,荧光性长处少数人找头。,细胞散布良好。。 假如你依然识别力紧张,可思索换得商业化的依从的连续上色剂的特地紧握剂。

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